タンパク質発現・受託生産なら、ヒゲタ醤油株式会社 研究開発部の応用微生物事業をご検討ください。皆さまのご要望に応じ、受託発現・受託製造を承ります。

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タンパク質発現キット(BICシステム)

タンパク質分泌発現キット(BICシステム)

「混ぜるだけ」で超簡単にプラスミド構築・選抜ができる、タンパク質の高分泌発現システム。

画期的なクローニング技術(BIC法)の発見により、多数のベクターの中から、タンパク質を最も高発現できる組合せを一挙に選抜できるようになりました。

ブレビバチルスの3つの特長、高生産、可溶性、非分解を、抜群の操作性で体感してください。

驚くほどカンタン、便利な、高発現キット

手軽に入手、誰でも使える

(1)タカラバイオから販売

コンピテントセル、ベクターをセットにした「BIC System」はタカラバイオ(TaKaRa -Clontech)から発売中。世界中どこの実験室でもご使用いただけます。

(2)特別な設備も、技術も不要

試薬・機器類は、大腸菌発現系と共通してご使用できます(プラスミド精製キットや振とう培養機など。クローニングに必要なバッファー類はキットに含まれるので、購入後すぐに実験を始められます。初めて分泌発現を行う方にも分かり易い、詳しい製品マニュアルがあります(和文・英文)

画期的技術だから、操作もカンタン、スピーディー

(1)カンタン操作

画期的なクローニング技術(BIC法)を使うので、PCR断片をベクターと共にコンピテントセルに混ぜるだけでプラスミド構築が可能です。ブレビバチルス菌体内での相同組換えを利用するため、制限酵素処理やライゲーション反応は必要ありません。

(2)ハイスループット処理

深底の96ウェルプレートを使えば、培養の再現性が良いため、複数検体のハイスループット処理が可能です。

まさに、大腸菌を凌駕する操作性です。

発現成功への近道1
- 発現モードの選択 -

タンパク質発現を成功させる1番目のポイントは、目的タンパク質の元々の局在と、発現モードを適切に合わせることです。

例えば元々、細胞内にあったタンパク質を分泌発現しようとしても、一部を除き、うまく発現しないケースが多いことが知られています。この例の場合、菌体内発現を選択することで、確実に成功率が上がります。

BIC Systemでは、プライマーに付加するベクター相同配列を変更することで、遺伝子の導入位置を選択できるようになっており、目的タンパク質に応じて、6xHis融合分泌発現・直接分泌発現・菌体内発現の発現モードを自由に選べます。

【局在】      【適切なモード】

細胞外・・・・・・・・分泌発現

(分泌タンパク質) 

 

細胞膜・・・・・・・・分泌発現

(膜タンパク質)           (細胞外ドメイン)

 

細胞内・・・・・・・・菌体内発現

(細胞内タンパク質)

ブレビバチルスの菌体内発現:近年、菌体内発現能力の高さも明らかになりつつあります。大腸菌で0.1g/L程度だが、可溶性で7g/Lの生産を達成した例があります(グルタミン酸デヒドロゲナーゼ)。

発現成功への近道2
- 分泌シグナルの選択 -

タンパク質発現を成功させる2番目のポイントは、目的タンパク質に合う分泌シグナルを見つけることです。

目的タンパク質と分泌シグナルの相性によって生産量が増減することが知られています。しかし、その相性についての法則性は無く、ケースバイケースの為、実際に試験して試してみるしか方法がないのが現状です。

BIC Systemでは、相性の良い、最適なシグナルを選択できるよう、分泌シグナルの異なる4種類のベクターをキットに含めてあります(pBIC1、pBIC2、pBIC3、pBIC4)。何れのベクターとも、過去に実績のある厳選されたツールです。

1つの目的遺伝子に対して、この4つのベクター全てを試すことで、確実に成功率が上がります。プラスミド構築が非常に簡単なBIC法なので、こういった選抜も容易に行えます

料金表

弊社製品の料金についてご案内いたします。

製品料金表

1. BIC System

(製品コード HB300)

*これだけあれば始められます(下記の2.+3.)

¥100,000

2. pBIC DNA Set

(製品コード HB310)

*ベクターの補充に

¥80,000

3. Brevibacillus Competent Cells

(製品コード HB116)

*コンピテントセルの補充に

¥30,000

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